简单、敏感和具有成本效益的化验分析大户脆弱的障碍

脆性X综合征,智力残疾的最常见的遗传原因,也是频繁导致自闭症,特点是异常的FMR1基因很难分析。临床前研究脆性X和大户脆弱的疾病是由于缺乏低成本和敏感而简单的方法。国立卫生研究院(NIH)的研究人员已经开发出一套健壮的化验,足够便宜,常规研究使用,并可适用于初始病人筛查,根据一项新的报告分子诊断的杂志。

脆弱的大户障碍导致扩张hyper-variable和methylation-prone trinucleotide-repeat束在FMR1基因。脆性X综合征患者通常有超过200个重复而患者55到200重复X-associated脆弱的风险原发性卵巢功能不全和脆弱X-associated震颤、共济失调综合症。

“仔细分析总数的重复,重复道,中断的数量和甲基化状态FMR1基因是重要的正确理解的个体传播的风险较大的等位基因的后代,他们的个人疾病病理学的风险。也是解决一些重要的研究问题的关键,”凯伦Usdin解释说,博士学位,高级调查员和首席的基因结构和疾病部分,实验室的细胞和分子生物学,国家糖尿病、消化和肾脏疾病研究所,国家卫生研究院(马里兰州贝塞斯达)。

新的化验有能力扩大等位基因高达约1000重复,即使在患者样本马赛克,即有一个混合物的细胞有不同的重复数字。化验足够敏感分析唾液样本以最小的净化。测试可以在时间表内完成类似于最近商业诊断化验(不到24小时,以确定重复大小和/或甲基化状态,不到24小时,以确定中断状态和甲基化百分比)和具有可比性的实践所需的时间。这些检测可以检测DNA甲基化的些微变化,使它们在寻找有用的新药反向重复扩张的影响。

“重复数的基本分析,甲基化状态,和数量的不间断的重复成本不到5美元,马克通常被认为是基于人群筛查的门槛,”布鲁斯·海沃德说,博士学位,高级研究员在实验室的细胞和分子生物学和报告的第一作者。

开发这些化验,研究者能够改良了原有PCR分析分级只小等位基因使其规模更大的等位基因。”意识到潜在的更广泛的效用大小测定,然后扩大能力包括甲基化和中断状态。我们发现这些化验执行有力,即使在最具挑战性的情况下,“海沃德博士说。

研究人员希望这些分析将使用许多实验室研究与早期胚胎发育相关的事件和重复长度和甲基化状态对基因表达的影响和分化。“没有验证CGG-repeat数量和甲基化状态的能力,是不可能区分善意developmentally-regulated变化和工件产生不稳定的重复数量和甲基化通常与这些细胞,有关“Usdin博士说。