新的Covid-19 RNA测试在几分钟内提供准确的结果

伯明翰大学的研究人员发明了一种COVID-19检测方法，将检测时间从30分钟缩短到5分钟以下，并提供准确的结果。

该方法在MedRxiv上发表的一篇预印本论文(尚待同行评审)中进行了描述，研究人员还利用英国公共卫生部提供的患者样本RNA展示了他们的方法的快速和灵敏度。

该大学生物科学学院的Tim dafford教授评论道:“我们设计了一种新的测试方法，将横向流动测试的易用性和速度与RNA固有的敏感性相结合测试。它具有可在现有护理设备中使用的试剂，并满足在高吞吐量，近乎患者的测试中测试的需求，人们可以在他们的结果中排队等候。“

目前的金标是逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）试验。每个样本需要超过一个小时，并有两个步骤。需要30分钟的第一个使用逆转录酶酶将RNA转化为DNA。第二种使用DNA聚合酶复制DNA并将其扩增至可检测的水平，并且需要耗时的加热和冷却循环。虽然今年开发了单温工艺，但减少了以下步骤20分钟已经证明了具有挑战性。测量抗体存在的横向流动测试可能需要30分钟。

研究人员创造了一种用于将病毒RNA转化为DNA的新型单步方法，并将其与已知技术组合，称为指数放大反应（Expar），其将DNA浓度增加到恒定温度下的可检测水平。他们呼叫新方法逆转录酶免费外出（RTF-Expar）测试。

伯明翰大学企业已经申请了专利申请涵盖该方法及其在诊断设备中的使用，现在正在寻求许可专利以获得快速产品开发。

该方法使用DNA序列（称为粘合剂DNA），其识别和结合SARS-COV-2病毒RNA和识别粘合剂DNA的酶（BSTNI），并在存在病毒RNA时切割短部分。一旦发生这种裂解，病毒RNA就会自由结合到更多的粘合剂DNA，并重复循环。测试检测此循环的输出。

研究人员通过将BstNI、结合剂DNA和SARS-CoV-2样本引入EXPAR试剂并在50℃的恒温条件下培养来测试这种方法。对于阳性样品，这些条件在4.00 +/- 0.72分钟内产生测试结果。阴性(对照)样品在孵育10分钟后没有观察到信号。SARS-CoV-2 RNA的浓度呈阳性样本是72.7拷贝/μL，比Covid-19患者样品中发现的平均病毒载量低10倍的值。

该方法是开发的，以减少Covid-19测试中的时间并提高吞吐量。然而，该技术可以应用于任何RNA的传染病或疾病生物标志物（包括癌症），因此在长期之后，预计使用RTF-Expar的使用将超出SARS-COV-2。

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