新的快速CRISPR / CAS9方法识别斑马鱼脊髓再生中的关键基因

一种新的快速筛选方法使用CRISPR / CAS9技术来识别在修复斑马鱼脊髓损伤方面发挥至关重要作用的免疫系统相关基因。Marcus Keatinge和Edinburgh大学的Tsarouchas，U.K.和同事介绍了开放式期刊的这些调查结果Plos Genetics.。

在人类和其他哺乳动物中，切断的脊髓神经连接不会愈合，因此脊髓损伤可能导致永久性瘫痪。相比之下，斑马鱼能够从涉及巨噬细胞控制的炎症的过程中从脊髓损伤中恢复 - 一种免疫系统细胞。然而，斑马鱼中巨噬细胞患者脊髓再生的精确过程仍然是神秘的。

为了帮助澄清这一过程，Keatinge，Tsarouchas及其同事开发了一种快速识别患有斑马鱼脊髓再生的巨噬细胞相关基因的新方法。该策略采用CRISPR / CAS9技术，使研究人员能够瞄准和扰乱特定基因，从而揭示了它们的功能。称为合成RNA oligo CRISPR引导RNA（SCRRNA）的分子使得能够进行该基因特异性靶向。

研究人员将新方法应用于研究幼虫斑马鱼的脊髓再生。该方法的关键是预先筛选步骤，它们在350克拉氏菌中测试目标基因已知可能在炎症相关的脊髓再生中发挥重要作用。将这些SCRRNA介绍到斑马鱼的鉴定10基因，当中断时，从脊髓损伤中断损害损害。

进一步的分析将列表变为四个基因，该基因对于修复被切断的脊神经连接来说至关重要，验证了新方法。特别是TGFB1的一种基因似乎在控制恢复过程中控制炎症时起着基本的信号作用。

新的方法和调查结果可以帮助深化斑马鱼脊髓再生的理解。研究人员还说该方法可以适用于在其他生物过程中起重要作用的基因筛选。

作者补充道，“斑马鱼可以在受伤后完全再生脊髓。使用新的和非常快速的筛选平台，我们发现基因对的免疫系统是必不可少的再生。我们设想我们的调查结果导致新的见解，以便对哺乳动物无法生成和我们多功能的筛查平台来适应其他疾病或受伤模型斑马鱼。“

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