免疫- crispr试验有助于早期诊断肾移植排斥反应
当病人接受肾移植时,医生会通过多种方式仔细监测他们的排斥迹象,包括活组织检查。然而,这个过程是侵入性的,只能在后期发现问题。现在,研究人员报告分析化学已经开发了一种基于crispr的检测方法,可以敏感和非侵入性地检测尿液中急性肾排斥反应的生物标志物。有一天,这可能有助于更早地诊断排斥反应,而无需活检。
肾脏移植受者必须在余生中服用免疫抑制药物,以帮助他们的免疫系统不攻击外来器官。然而,肾脏排斥反应仍然可能发生,特别是在移植后的最初几个月,这被称为急性排斥反应。症状包括血清肌酐水平升高以及肾痛和发烧等症状。
目前,确诊的唯一方法是活检,但这种方法只能在相对较晚的阶段发现问题。能够在早期阶段敏感和非侵入性地诊断肾脏排斥反应将使医生能够更快地开始抗排斥药物治疗。研究人员此前发现,小鼠尿液中含有高水平的细胞因子蛋白CXCL9肾移植病人是排异反应的早期征兆。但目前测量CXCL9的方法(酶联免疫吸附试验,或ELISA)在尿液中效果不佳,限制了其敏感性。因此,Jonathan Dordick和他的同事们想要开发一种更敏感的技术,以非侵入性地诊断由尿液引起的急性肾排斥反应。
研究人员将检测方法基于CRISPR/Cas12a基因编辑技术。在CXCL9蛋白存在的情况下,CRISPR/Cas12a酶切割探针以产生荧光信号。研究人员通过附加DNA条形码来增强荧光信号,该条形码聚集了大量CRISPR/Cas12a分子,随后与识别CXCL9的抗体结合。
重要的是,与其他基于crispr的检测方法不同,不需要PCR扩增,这使得该方法更容易适应可以在医生办公室甚至患者家中使用的设备。当测试时尿液样本从11名肾移植患者中,新系统准确测量了CXCL9水平,其值与ELISA非常相似。然而,研究人员说,由于免疫- crispr系统比ELISA敏感约7倍,它可能能够在非常早期的阶段检测到肾移植排斥反应。
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